Expressão diferencial de genes associados à função neurovascular, ao equilíbrio entre excitação e inibição e à plasticidade sináptica no hipocampo de ratos submetidos ao status epilepticus.

Resumo

Introdução: O status epilepticus (SE) desencadeia respostas moleculares complexas que contribuem para a lesão hipocampal aguda, para a epileptogênese e para o surgimento posterior de crises espontâneas recorrentes. Objetivo: Avaliar a variação temporal na expressão de 17 genes candidatos associados à função e transporte neurovascular, ao balanço de excitação-inibição e homeostase de neurotransmissores, bem como à plasticidade e remodelamento sináptico no hipocampo de ratos submetidos ao modelo de Epilepsia induzido por lítio-pilocarpina. Métodos: Ratos Wistar machos adultos foram divididos em cinco grupos experimentais: controles (NAIVE), animais expostos ao protocolo de indução que não desenvolveram SE (NS), animais avaliados 24 h após o SE (SE 24h), animais crônicos que foram submetidos ao SE mas não apresentaram crises espontâneas recorrentes (NSRS) e animais crônicos com crises espontâneas recorrentes documentadas (SRS). O RNA total foi extraído do hipocampo esquerdo, e a expressão relativa dos alvos foi quantificada por RT-qPCR, utilizando a combinação Rplp1 e Actb como genes de referência normalizadores. As diferenças estatísticas entre os grupos foram avaliadas por ANOVA one-way seguida pelo teste de comparações múltiplas post hoc de Tukey. Resultados: A alteração mais abrangente no perfil de expressão ocorreu 24 h após o SE. Nesse fase aguda, o Bdnf apresentou uma superregulação acentuada em comparação a todos os outros grupos. Por outro lado, transcritos relacionados a transportadores associados à barreira hematoencefálica (BHE) e proteínas de junção oclusiva (Abcb1b, Abcg2, Ocln), canais iônicos e receptores (Scn1b, Slc6a1, Grik4, Hcn2, Grm5), e reguladores sinápticos/de plasticidade (Syp, Mtor) estavam significativamente reduzidos no grupo SE 24h em comparação a um ou mais grupos controle ou crônicos. Em contrapartida, Kdr, Vegfa, Gad2, Ngf e Creb1 não apresentaram variação estatisticamente significativa entre os cinco grupos. Nos animais crônicos, emergiram assinaturas transcricionais específicas: o Glul apresentou aumento da expressão nos grupos NS e NSRS em comparação ao NAIVE, enquanto Slc6a1, Syp e Mtor estavam super-regulados no NSRS quando comparados ao NAIVE. Além disso, o Scn1b apresentou-se super-regulado no NS em comparação aos grupos NAIVE e SRS. Conclusão: O SE induzido por lítio-pilocarpina desencadeia uma resposta hipocampal estágio dependente, caracterizada por uma robusta indução aguda de Bdnf acompanhada por uma ampla supressão de transcritos neurovasculares, de excitabilidade e sinápticos. Estágios crônicos e fenótipos sem SE/sem recorrência exibem perfis transcricionais restritos, compensatórios ou específicos do desfecho, destacando que a exposição ao protocolo, a ocorrência do SE e a recorrência crônica de crises representam estados biológicos distintos.

Palavras-chave

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